【五分钟讲实验】如何做好天狼星红染色实验？

天狼星红染色（Siriusred）：由于胶原呈碱性，与酸性染料起强烈反应。天狼星红就是一种很强的酸性染料，它可以和胶原纤维反应使胶原纤维产生明显的双折光现象。天狼星红染色胶原纤维呈红色，胞核呈绿色，余呈黄色。

1. 石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ10min-无水乙醇Ⅱ10min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2. 天狼猩红染色液染色：切片入饱和枯萎蒜天狼猩红染色液内染色8min。

3. 漂洗：切片入无水酒精漂洗数分钟，显微镜下观察满意为止。

4. 封片：切片于60°烤箱烤干后于二甲苯透明5min，中性树胶封片。

5. 显微镜镜检，图像采集分析。

6. 染色结果：光学显微镜下胶原纤维红色，背景黄色。

1. 染液配制时,饱和枯萎蒜一定要过饱和,配制时要长时间搅拌后还有不溶的情况下才为饱和的。

2. 饱和天狼猩红染液是一种两色混合染液,两种颜色同时都有作色能力,而且存在一定得制约平衡关系,所以染液在长期使用时随着带入的杂质过多,可能会影响这种平衡关系,所以建议染色结果不对时,应立即更换染液。

3. 天狼猩红染色前，需要尽量将水甩干，避免多次染色后带入较多的水分使染液的染色能力下降。

4. 染色后脱水时使用新的无水乙醇，并快速脱水，长时间脱水会影响染色结果。

5. 如果需要染核，可以先染完天狼猩红后在用苏木素染核。