【科研干货】晶莱生物实验小tips

【晶莱生物】谈谈实验中半定量数据的统计和处理:在实验结果中，半定量数据是最为常见的，但是半定量数据的处理和统计方法却有很多,不同处理方法得出的结果千差万别；不仅如此，有些半定量实验有自己默认的统计方法。因此，如果你的实验结果是阴性的，并不一定是结果的问题，可能是统计方法的问题。例如，western blot是经典的半定量实验，其统计方法主要是通过确定条带的灰度值，然后与内参相比，随后得出不同组之间的相对表达量。这里需要注意，WB的灰度值一般来说有两种统计方法，一种是累积密度值，一种是平均密度值。首选累积密度值来进行统计；防止假阳性太高；如果说WB的条带大小差异太大，这时需要选择平均密度值进行统计（以减少因为选区的差异，导致的假阴性）。再如荧光半定量统计，有两种处理方法，一种是平均荧光值，一种是累积密度值；前者通常使用在多个感兴趣区域进行均化处理，后者运用在进行整体选区的统计处理（例如血管、纤维化等）。当然，有时两者也会进行转换：例如，在荧光密度比较弱的情况下，为了提高准确度，会选取累积密度值；而在对于大体标本中具体部位（例如粘膜下层、肌肉层）进行特定统计时，可以选择平均密度值来操作，用来提高实验的阳性率，减少假阴性。

上述处理原则，需要根据实验的特定环境而定。如果您对上述问题仍感到困惑，晶莱生物可以提供免费的一对一咨询和解答，帮您走出实验困境！（晶莱生物www.genelb.cn）