01 经典动物模型常见的造模方法是什么？

   动脉粥样硬化----Apoe

   高血压---SHR  

   类风湿性关节炎---DBA

   高血糖糖尿病 ---db/db

   肥胖小鼠---OB/OB

 

02 常见动物模型的构建技巧

   MCAO模型的构建进线技巧---线栓头进入颈内时，先将血管拉直，然后用镊子轻抬线栓头，自然放松血管，进行进线即可，进线时需要注意血管处于自然状态，当标记刻度即将进入分叉点时，速度要慢，有轻微阻力时，停止进线，线栓撤回1mm。尤其注意小鼠模型构建时，非常容易做成脑出血的模型（常规表现动物扭体、翻转和无法行走）。可采用6-0尼龙线进行硅胶包埋，能大程度上降低插入线栓的应力，从而降低刺破血管。

 

   II糖尿病大鼠模型---使用STZ量与高脂饲养周期成反比，需要严格和一型糖尿病模型进行区分，模型验证方式IGTT/OGTT，模型构建后需要继续喂养高脂饲料维持高血糖状态。

 

   大鼠心梗模型构建---尽量采取呼吸麻醉的方式进行手术，结扎位置在心耳下缘1-2mm出，如果采用挤心脏的方式进行手术，需要考虑到心脏挤压，心脏本身的变化和心耳大小的改变，可以参照心室沟的位置进行校准和选择。体重采用190-220g的动物最佳。

 

   BDL模型构建---在分离胰胆管的时候，尽量选择在胰腺上方、门静脉处分离，可以大程度降低模型死亡率。结扎胆管的时候，选择两处结扎。白化动物在术后5d左右会明显耳朵，尾巴变成黄色。

 

   肝缺血再管模型构建---为保证肝脏充分的再灌注损伤，在恢复血流的时候，可以用湿棉签充分按压肝脏使其颜色充分变红。手术全程需要保证脏器湿润。

 

03 对不同的血液指标的检测，抗凝剂该如何选择?

   EDTA---血常规（紫色帽）

   枸橼酸钠---凝血功能（蓝色帽）

   草酸钾/氟Hua钠---抑制糖分解，血糖测试（灰色帽）

   枸橼酸钠---血沉淀（黑色帽）

   肝素钠---血浆生化，血气分析（绿色帽）

   分离胶---血清生化检测（黄色帽）

   普通血清分离（促凝和自然凝血，红色帽）

 

04 常见的行为学实验及其实验目的有哪些？

   旷场实验---评价实验动物在新环境中的自主行为、探究行为与紧张度。

   轮转实验---衡量动物的协调平衡能力和疲劳情况。

   鼠尾悬挂---通过记录动物试图逃跑的挣扎行为，包括挣扎的次数、挣扎的时间和挣扎的强度等来鉴别实验动物是否患有抑郁。

   水迷宫实验---用于测试实验动物对空间位置感和方向感（空间定位）的学习记忆能力。

   转圈实验---转圈实验设计用于分析啮齿类动物单侧脑损伤导致的转圈行为。

   八臂迷宫---用来检测药物或大脑受损状态下学习和记忆方面的表现。

   巴恩斯迷宫---巴恩斯迷宫利用啮齿类动物避光喜暗且爱探究的特性检测动物空间记忆的模型。

 

05 心脏的病理取材与TTC染色技巧

   采用立体心脏离体灌流的方式冲洗心脏，这样不会破坏心脏结构，也可以去除掉心腔和心肌的血液，使染色后的病理组织干净易观察。心脏红白蓝染色方法同。

 

06 软组织电镜取材注意事项

   软组织电镜取材时，可以先灌注、固定，然后分离出1cm左右的组织，放入电镜液中，固定30min后，组织变硬利于改刀的情况下，取表层的组织，进行改刀固定分装，注意避光和低温。

 

07 为什么高脂饲养的动物在饲养之初体重生长很慢？

   需要用高脂饲料喂养的动物，比如动脉粥样硬，高血脂，肥胖，II型糖尿病模型，脂肪肝等疾病模型，因为饲料脂肪含量高，饲料比软，而且动物前期不喜欢吃这种饲料，有时候会出现动物体重生长过慢，甚至进食困难。可在正常饮食的情况下，逐渐替换高脂饲料，且需要定期观察动物体重指标，若发现动物磨牙情况，放入磨牙棒改善磨牙情况，已发生牙齿过长无法进食的情况，应给予人工修整牙齿。