重磅上新｜小鼠乳腺类器官构建体系，助力乳腺发育与泌乳研究

乳腺是一个高度动态、受激素精细调控的器官，其上皮结构在青春期、妊娠、泌乳及退化过程中持续发生重塑。乳腺上皮细胞的增殖、分化以及腔面细胞与基底/肌上皮细胞之间的协同，是乳腺发育和泌乳功能形成的重要基础。

传统二维培养难以充分重建乳腺上皮细胞的空间组织、细胞极性及细胞间相互作用；动物体内实验虽然能够反映整体生理过程，但在模型表征、机制研究和高通量药物筛选方面存在局限。因此，建立来源明确、结构可观察、可扩增并可开展功能诱导的小鼠乳腺三维模型，有助于乳腺发育、激素响应和泌乳相关机制研究。

近日，晶莱生物类器官研究中心基于小鼠乳腺组织建立了乳腺类器官构建与培养流程。

图1丨小鼠乳腺类器官明场观察图

图2丨小鼠乳腺类器官免疫荧光染色结果

通过乳腺组织获取、组织消化与上皮组分富集、三维基质包埋培养，可形成球状、腺泡样或分支/小叶样乳腺类器官结构，并可结合上皮谱系、基底/肌上皮谱系及泌乳相关指标开展进一步鉴定与功能评价。

以小鼠乳腺组织为起始材料，经组织剪碎、酶消化和细胞/组织片段分离，可获得用于三维培养的乳腺上皮相关细胞群体。对于妊娠期或泌乳期来源样本，初代处理中常可观察到较丰富的腺泡/小叶相关组织结构以及脂滴、乳汁样内容物或组织碎片，需要通过后续培养和传代逐步完成组织纯化与状态稳定。

原代阶段的样本质量、消化程度及上皮组分保留情况直接影响后续类器官形成效率。因此，构建过程中需兼顾充分释放乳腺上皮结构与避免过度消化，以保留具有再生和三维组织化能力的细胞群体。

在三维培养条件下，乳腺来源上皮细胞可进一步聚集并形成具有乳腺组织特征的三维结构。不同培养阶段可观察到球形、腺泡样、囊泡样或分支/小叶样结构；随着培养时间延长，类器官体积增加、上皮结构逐步完整，并可根据来源阶段和培养条件表现出不同程度的腔样结构与组织复杂度。

与二维培养相比，乳腺类器官能够提供更接近组织状态的三维微环境，可用于观察乳腺上皮细胞增殖、极性建立、腺泡/导管样结构形成及激素响应等过程，为乳腺发育和功能研究提供可控的体外模型基础。

乳腺类器官可通过EpCAM、E-cadherin及KRT8/KRT18/KRT19等上皮或腔面上皮相关标志物进行表型评价。上述指标的表达可用于支持类器官的乳腺上皮来源，并辅助判断上皮结构完整性和腔面细胞相关表型。具体指标组合应结合样本来源、培养阶段和研究目的确定。

乳腺组织由不同上皮谱系共同构成。根据模型类型和研究目的，进一步检测KRT14、KRT5、等基底/肌上皮相关指标，用于观察类器官中基底细胞或肌上皮样细胞相关表型。

对于泌乳功能相关研究，可在类器官扩增和结构稳定后进入泌乳分化阶段，并结合脂滴及乳蛋白相关指标进行评价。可根据研究目的采用BODIPY或Nile Red观察脂质积累。泌乳功能评价应结合诱导条件、样本来源和多指标结果综合判断，不建议仅凭单一脂滴染色作出功能结论。

小鼠乳腺类器官可作为乳腺发育、激素调控及泌乳功能研究中的三维体外模型，并可根据研究目的扩展疾病建模、基因功能验证和药物/营养干预等实验。

1. 乳腺上皮发育、腺泡/导管样结构形成及组织重塑研究

2. 雌激素、孕激素、泌乳素等激素相关信号与乳腺分化研究

3. 泌乳分化、脂滴形成及乳蛋白表达等功能评价

4. 基因功能、药物干预、营养因子及乳腺损伤/修复相关研究

注：本模型用于科研服务与体外研究支持；不同小鼠生理阶段、组织来源及培养条件可影响类器官形态、细胞组成和功能表现，具体模型命名、样本纳入标准、鉴定指标及功能评价方案需结合项目目的进一步确认。