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脂肪肝动物模型覆盖的病理阶段并不相同，HFD以肥胖、胰岛素抵抗和肝脂肪变为主；Western/GAN类饮食可进一步形成MASH样炎症和纤维化；CDAHFD则以造模周期较短、肝损伤和胶原沉积较明显为特点。

肠道衰老由肠道上皮（内在细胞固有因素）、肠神经系统 ENS、肠道菌群（外源环境因素）三者共同参与，但是不知道谁是主导驱动因素，三者之间如何相互调控。

T细胞从静息到活化、扩增和分化，都伴随着明显的代谢重编程。脂质在其中不仅提供能量和细胞膜原料，还参与TCR信号、细胞分化和氧化应激调控。不同T细胞亚群对脂肪酸、胆固醇等脂质的获取和利用方式并不相同，同一种脂质变化在不同细胞状态和组织环境中，也可能产生不同结果。

细胞水平的过表达、敲低结合磷酸化 WB，仅能证明蛋白间存在调控相关性，无法直接证实激酶‑底物的直接作用关系。体外磷酸化实验（in vitro kinase assay）将激酶、候选底物与 ATP 置于简化的体外反应体系。当活性激酶可提升底物磷酸化信号，同时激酶失活、移除 ATP、突变磷酸化位点后该信号随之减弱，即可为二者的直接磷酸化调控提供关键证据。

2026年8月31日，国家药品监督管理局药品审评中心（CDE）就《单克隆抗体动物试验减少或替代指导原则（征求意见稿）》公开征求意见。文件提出，在单克隆抗体非临床安全性评价中，可综合有限动物试验、非动物试验、临床应用以及同类药物信息开展证据权重评价，并将细胞、类器官/器官芯片、组学和计算模型等纳入非动物试验方法。

类器官-免疫细胞共培养是在类器官体系中引入免疫组分，用于研究组织细胞与免疫细胞之间的相互作用，可用于免疫细胞杀伤与浸润、炎症反应、黏膜免疫以及肿瘤免疫微环境等研究。

人多能干细胞来源的肾脏类器官，是体外研究肾脏发育、肾病机制、药物筛选的核心模型。但传统建模方案一直存在致命短板，极大限制了科研应用场景

当线粒体状态发生变化时，大家最先想到的往往是ATP、膜电位和ROS，而深入开展机制研究时，还需要进一步考察线粒体呼吸功能、电子传递链活性、mtDNA拷贝数、线粒体形态动力学和线粒体自噬等多个维度。

乳腺是一个高度动态、受激素精细调控的器官，其上皮结构在青春期、妊娠、泌乳及退化过程中持续发生重塑。乳腺上皮细胞的增殖、分化以及腔面细胞与基底/肌上皮细胞之间的协同，是乳腺发育和泌乳功能形成的重要基础。

LPS 是炎症、免疫和药效评价实验中最常用的造模试剂之一。无论是细胞炎症模型，还是小鼠急性炎症、内毒素血症、急性肺损伤等动物模型，LPS 都有广泛应用。

类器官中的基因表达往往具有明显空间差异。qPCR可以检测整体RNA变化，整装原位杂交（Whole-mount in situ hybridization，WISH）则直接在完整类器官中显示目标RNA的位置，同时保留三维形态和区域结构。

细胞培养出现污染，不一定都会表现为培养液明显浑浊。细菌和真菌通常比较容易通过培养液和显微镜发现，而支原体污染往往没有明显外观变化，却可能持续影响细胞增殖、代谢、转染效率和基因表达。

卵巢癌（ovarian cancer）是妇科恶性肿瘤的重要类型之一，具有明显的组织学与分子异质性。不同病理亚型在细胞来源、药物敏感性及疾病进展过程中存在显著差异，因此，建立患者来源、能够在体外长期观察和干预的人源模型，是开展疾病机制研究与药物评价的重要基础。

2型糖尿病肾病（DKD，又称糖尿病肾病DN）研究中应用最广泛的基因型自发性模型为BKS-db/db（简称db/db）小鼠，该品系在C57BLKS/J遗传背景下携带瘦素受体（Lepr）基因纯合功能缺失突变，可自发出现病态肥胖、高血糖、高胰岛素血症及血脂异常，并随周龄进展发生与人类DKD高度相似的进行性肾脏病理损伤，是DKD发病机制研究与临床前药物评价的金标准模型。

做质粒过表达、siRNA敲低等实验时，转染是很常见的一步。但同样的试剂和核酸，有时效率很高，有时却出现细胞大量变圆、脱落，或者细胞状态正常但几乎没有表达效果。转染结果不仅取决于试剂本身，转染前的细胞状态、铺板密度，转染中的核酸用量和复合物制备，以及转染后的培养时间都会影响最终结果。

双荧光素酶报告基因实验是分子生物学中验证基因表达调控的经典手段，广泛用于启动子/增强子活性分析、转录因子调控和miRNA靶基因验证等场景。

皮下异位模型仅能快速初筛药物，但缺失器官特异性微环境，预测性差；原位模型解决原发肿瘤临床复刻问题，转移模型专门弥补晚期转移疾病研究缺口，二者为互补模型，不可互相替代；临床前完整药物评价需联合两类模型。

Transwell侵袭实验常用于评价肿瘤细胞等穿过细胞外基质屏障的能力。操作步骤看起来并不复杂，但基质胶铺板、细胞接种量、血清梯度和培养时间中任何一个条件没有控制好，都可能造成孔间差异过大、所有组都穿不过膜，或者膜下细胞多到无法准确计数。

动物模型在糖尿病研究中发挥着至关重要的作用。但鉴于1型与2型糖尿病存在显著差异，研究者必须采用针对不同疾病类型的特异性动物模型，才能更深入地解析疾病的损伤机制，评估新型治疗方案的疗效。

皮下移植瘤模型中，游标卡尺测量肿瘤是最常用的动态监测方法之一。2024 年发表于《Nature Protocols》的OBSERVE 啮齿类肿瘤模型优化指南，专门给出了卡尺测量的操作定义与规范；同年NCI PDXNet 共识也对皮下肿瘤的测量频次、体积计算与药效评价给出了明确建议。